Eine wichtige Komponente von zellulären Membrantransferprozessen, der Transport Protein Particle (TRAPP) II Tethering Komplex, kristallisierte sich als eine Schlüsselstelle für die Integration von Licht- und Hormonsignalen heraus (Assaad et al, unpublished). In diesem Zusammenhang lieferte ich eine Vielzahl verschiedener Hinweise für die Verknüpfung von TRAPPII und der Brassinosteroid (BR)-Signaltransduktion in Arabidopsis thaliana. Erstens schließen dynamische Protein-Interaktoren, die mittels Immunopräzipitation-Massenspektrometrie (IP-MS) identifiziert wurden, auch Komponenten der BR-Signaltransduktion ein. Zweitens beeinflusst BR den Phänotyp von trappii Mutanten und die Gleichgewichtskonzentration der TRAPPII-Untereinheit TRS120. Drittens wurden zwei Phosphorylierungsstellen in IP-MS identifiziert, welche mutmaßlich von einer im BR-Signalweg zentralen Kinase reguliert werden. Diese sollten in Kinase-Assays weiter untersucht werden. In Hefen und Säugetieren ist die am besten verstandene Funktion von TRAPPII die der Guanin-Austausch Faktoren (GEFs) für Ras related in brain (Rab)-Proteine im Rahmen von Membrantransferprozessen. Um diese auch in Pflanzen vermutete GEF-Aktivität von TRAPPII zu überprüfen, habe ich die Lokalisierungsdynamik von RabA2a-YFP in trappii Mutanten untersucht. Meine Beobachtungen zeigten, dass ein Nullallel des TRAPPII-Locus (trs120-4) den GDP-blockierten Phänotyp verstärkt und den GTP-blockierten Rab-Phänotyp teilweise unterdrückt. Somit wird ein stringenter Nachweis auf genetischer Ebene dafür geliefert, dass TRAPPII als GEF für RabA-Proteine diese Familie von Rab GTPasen fungiert. Es ist unabdingbar die Regulation von GEF-Rab-Interaktionen besser zu verstehen, um Membrantransferprozesse und die Mechanismen aufzudecken, die Transportwege in Abhängigkeit von Entwicklungs- und physiologischen Signalen verändern.

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Benjamin Al conducted this work at the Botany Department in the working group of apl. Prof. Dr. Farhah Assaad.